La inmovilización de ADN y ARN sobre transductores electroquímicos con el objetivo de obtener plataformas de reconocimiento molecular, ha recibido gran atención debido a sus excelentes propiedades de biorreconocimiento. Los aptámeros (ácidos nucleicos sintéticos ssADN o ARN) han sido muy estudiados en los últimos años debido a su capacidad de reconocer e interactuar específicamente con diversos analitos de interés, por ejemplo proteínas y fármacos.
En esta presentación se describe una novedosa alternativa para el diseño de nuevas plataformas electroquímicas de biorreconocimiento molecular basadas en la inmovilización de ADN y aptámeros sobre carbono vítreo (GCE) modificado con nanotubos de carbono (MWCNT) dispersos en polilisina (PLys). Esta plataforma se empleó para el desarrollo de biosensores de afinidad que permitan la detección selectiva de secuencias específicas de ADN y/o de trombina utilizando, como elemento de biorreconocimiento, un aptámero anti-trombina.
El esquema de trabajo consistió en la modificación de transductores de carbono vítreo por deposición de una dispersión de nanotubos de carbono de pared múltiple en una solución de poli-L-lisina cargada positivamente. Sobre GCE/MWCNT-PLys se llevó a cabo la inmovilización de los ácidos nucleicos (secuencias de ADN de interés clínico y aptámero anti-trombina) a ser empleados como moléculas ?captoras?.
Se diseñó una estrategia de inmovilización de oligonucleótidos analizando las condiciones óptimas de adsorción. La inmovilización tanto de ADN como del aptámero fue realizada en condiciones hidrodinámicas a circuito abierto. En el caso del aptámero se llevó a cabo, posteriormente, la formación del complejo de bioafinidad con la molécula ?target? (trombina). Los procesos de adsorción e interacción se siguieron a través de los cambios de la señal voltamperométrica de la oxidación de guanina. La eficiente inmovilización de ADNs sobre GCE/MWCNT-PLys representa una alternativa novedosa y muy interesante para el desarrollo de biosensores de afinidad para la detección electroquímica de diversos bioanalitos.
